細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒

Enzo Life Sciences的CELLESTIAL^® 系列產(chǎn)品涵蓋了廣泛應(yīng)用于活細(xì)胞分析的熒光分子探針，用于要求嚴(yán)格的成像應(yīng)用，如共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀和高內(nèi)涵篩選（HCS），具有需要一致性和可重復(fù)性。

NUCLEAR-ID^® Green （綠色熒光）和GFP-CERTIFIED^® NUCLEAR-ID^®（紅色熒光）兩款周期分析試劑盒，為通過流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞周期進(jìn)程的誘導(dǎo)和抑制研究提供了一種便捷的方法，且細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果不受培養(yǎng)時(shí)間、溫度、染料和細(xì)胞密度影響。可以用于以下方面：

（1）確定給定樣品處于Ｇ0/Ｇ1，Ｓ和Ｇ2/Ｍ 期細(xì)胞的百分比，以及細(xì)胞凋亡之前定量亞Ｇ1期的百分比。

（2）正常細(xì)胞系和表現(xiàn)出多倍性細(xì)胞系的活細(xì)胞、透性化及固定細(xì)胞的 DNA 研究。

本試劑盒可用于約100次的流式細(xì)胞儀檢測(cè)。使用 Nocodazole 諾考達(dá)唑處理的細(xì)胞作為對(duì)照以檢測(cè)細(xì)胞周期動(dòng)力學(xué)的變化?；罴?xì)胞研究也可應(yīng)用于細(xì)胞 DNA 含量的測(cè)定、細(xì)胞周期增長(zhǎng)模式變化的檢測(cè)、細(xì)胞凋亡監(jiān)測(cè)，以及評(píng)估腫瘤細(xì)胞變化和抑制基因機(jī)制。

◆NUCLEAR-ID^® Green cell cycle kit

ENZ-51014-100

本試劑盒中熒光染料為綠色。不適用于含綠色熒光蛋白或用 FITC 等綠色染料標(biāo)記的細(xì)胞。

●　應(yīng)用：流式細(xì)胞儀，熒光顯微鏡檢測(cè)

●　樣品類型：正常細(xì)胞系和表現(xiàn)出多倍性細(xì)胞系，活細(xì)胞、透性化細(xì)胞及固定細(xì)胞均可

●　儲(chǔ)存溫度： -20°C短期保存，-80°C長(zhǎng)期保存

●　試劑盒組分：NUCLEAR-ID^® Green Cell Cycle Detection Reagent, 100 µL

●　試劑盒組分：Nocodazole Control, 10 µL

●　試劑盒組分：10×Assay Buffer, 15 mL

特點(diǎn)

●　染色方法簡(jiǎn)便，加入染料后直接通過流式細(xì)胞儀分析（100 tests）

●　激發(fā)光波長(zhǎng) 488 nm，發(fā)射光波長(zhǎng) 530 nm，顯示為綠色熒光

●　不需要細(xì)胞打孔或 RNA 酶處理

●　結(jié)果不受細(xì)胞周期培養(yǎng)時(shí)間、溫度、染料和細(xì)胞密度影響

●　從活的或固定細(xì)胞中讀取 DNA 內(nèi)容信息

●　監(jiān)測(cè)由藥物治療或其他干擾引起的細(xì)胞周期動(dòng)力學(xué)的變化采用大范圍的細(xì)胞密度進(jìn)行性能驗(yàn)證

◆NUCLEAR-ID^® Red cell cycle kit (GFP-CERTIFIED^®）

ENZ-51008-100

本試劑盒中熒光染料為紅色。對(duì)于含綠色熒光蛋白或用FITC等綠色染料標(biāo)記的細(xì)胞同樣適用。

●　應(yīng)用：流式細(xì)胞儀，熒光顯微鏡檢測(cè)

●　樣品類型：正常細(xì)胞系和表現(xiàn)出多倍性細(xì)胞系，活細(xì)胞、透性化細(xì)胞及固定細(xì)胞均可

●　儲(chǔ)存溫度： -20°C短期保存，-80°C長(zhǎng)期保存

●　試劑盒組分：NUCLEAR-ID^® Red Cell Cycle Detection Reagent, 200 µL

●　試劑盒組分：Nocodazole Control, 10 µL

●　試劑盒組分：10×Assay Buffer, 15 mL

特點(diǎn)

●　可檢測(cè)活細(xì)胞，固定細(xì)胞和透化的細(xì)胞中 DNA 含量信息的完整試劑盒

●　穩(wěn)定且高純度的紅色熒光染料

●　采用不同細(xì)胞密度進(jìn)行性能驗(yàn)證

●　無需 RNase 處理

●　可檢測(cè)藥物處理或者其他因素引起的細(xì)胞周期變化

●　無需 UV 激發(fā)

●　無光漂白效應(yīng)

●　可與其他探針與染料一同使用

●　制造嚴(yán)格、消除非特異性檢測(cè)偽影

●　兼容 GFP 綠色熒光蛋白及 FITC

Figure 1: 使用結(jié)構(gòu)化照明方法，綠色熒光蛋白表達(dá)（GFP表達(dá)）線粒體和細(xì)胞核之間的空間關(guān)系的三維重建

Figure 2: Drug treatments with live cells inhibit cell cycle progression at different phases.

活細(xì)胞藥物治療抑制不同階段的細(xì)胞周期進(jìn)程。

NUCLEAR-ID^® Red DNA Stain 與其他染料的比較

實(shí)驗(yàn)操作

A. 用NUCLEAR-ID^® 紅色染料進(jìn)行細(xì)胞染色后，使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞周期 DNA 分析

1.　使用（或不使用）實(shí)驗(yàn)化合物處理細(xì)胞。試管中懸浮細(xì)胞液濃度低于5×10⁵ / mL。

2.　選擇介質(zhì)或普通細(xì)胞培養(yǎng)緩沖液與 NUCLEAR-ID^® 紅色 DNA 染色溶液混合。

3.　推薦使用 NUCLEAR-ID^® 紅色 DNA 染色溶液的250倍至500倍稀釋液進(jìn)行活細(xì)胞周期 DNA 分析（終濃度分別為40 μM至20 μM）。

4.　將細(xì)胞重懸于 0.5 mL 新稀釋的染色溶液中。

5.　輕輕混合后，室溫或37℃下孵育15-30分鐘。

6.　直接用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞而無需進(jìn)一步處理或洗滌。

7.　488 nm 激發(fā)激光分析樣品使用流式細(xì)胞儀 PerCPCy5.5 或 FL3 通道檢測(cè)。對(duì)于 633 nm 激發(fā)，選用適當(dāng)?shù)氖占?/span>過濾器 > 700 nm，F(xiàn)L4 

      或 FL5，APC-Cy7 通道。

B. 經(jīng)NUCLEAR-ID^® 紅色染料染色的活細(xì)胞用熒光/共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞核變化

1.　貼壁細(xì)胞：在含有適當(dāng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內(nèi)的蓋玻片上培養(yǎng)貼壁細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞達(dá)到所需的數(shù)量時(shí)，小心地除去培養(yǎng)基并稀釋到（~100 μL）2000

      倍至 4000 倍（在選擇培養(yǎng)基或緩沖液中）使 NUCLEAR-ID^® 紅色 DNA 染料能夠（終濃度分別為 5.0 μM 至 2.5 μM）覆蓋到單層細(xì)胞。

      懸浮細(xì)胞：室溫（RT）下以 400× 離心5分鐘獲得細(xì)胞懸浮液。小心吸除上清液，并進(jìn)行 2000-4000 倍稀釋（在選擇培養(yǎng)基或緩沖液中）

      使 NUCLEAR-ID^® 紅色 DNA 染料能夠（終濃度分別為 5.0 μM 至 2.5 μM）覆蓋到單層細(xì)胞。

2.　樣品避光保存，并在37°C孵化15-30分鐘。

3.　用 100 μL 緩沖液（如 PBS）洗滌細(xì)胞。去除多余的緩沖液，將蓋玻片放在載玻片上。使用廣角熒光或共焦顯微鏡（推薦放大 60 倍）觀察染色

      后的細(xì)胞。使用標(biāo)準(zhǔn)羅丹明或德克薩斯紅色過濾器集成像系統(tǒng)。

相關(guān)產(chǎn)品資料請(qǐng)點(diǎn)擊下載：活細(xì)胞熒光分析 Ver.3

※ 本頁面產(chǎn)品僅供研究用。研究以外不可使用。