3D培養(yǎng)和3D支架組織工程研究的有用工具

去端肽膠原，蜂窩海綿

Atelocollagen Honeycomb

◆背景

　　“蜂窩"膠原海綿具有方向統(tǒng)一、均勻的孔（200-400 μm），細胞可以穿透并在其中增殖密集地排列。這種結構有利于營養(yǎng)物質到海綿內為細胞做準備供應，并釋放代謝廢物和生化產物。細胞能夠增殖且填充管腔，形成均勻的細胞團。

◆去端肽膠原的特點

　　去端肽膠原是由蛋白酶溶解的膠原，但是它的物理性質幾乎與天然未加溶的膠原蛋白相同。而去端肽膠原更具有良好的特性。

◆特點與優(yōu)點

　　“蜂窩"膠原海綿由高度純化I型去端肽膠原制備（牛皮來源），并且可以通過膠原酶降解。

◆應用

　　3D培養(yǎng)

　　組織工程3D支架研究

◆使用實例

實例 1

NG1RGB人成纖維細胞在蜂窩圓盤（KOU-CSH-96）

實例 2

胚體在蜂窩海綿支架體內移植后的胚體致畸移植

　　小鼠腎臟在海綿蜂窩支架移植（EB/+CSH）胚體移植后12周后，沒有形成畸胎瘤的跡象，而無KOU-CSH-10（ES/-CSH）的所有小鼠胚體培養(yǎng)產生畸胎瘤。組織學上，移植ES/+CSH與相鄰的主腎組織沒有明顯區(qū)別，表明沒有具體的誘導自發(fā)分化難以區(qū)分。

　　方法：板中培養(yǎng)小鼠胚胎干（ES）細胞進行yi蛋白酶處理，通過尼龍網過濾，接種到96孔板（1×10⁴ 細胞/孔），培養(yǎng)5天，形成胚狀體（EB）。當EB與蜂窩海綿（KOU-CSH-10）混合，EB迅速、均勻融入KOU-CSH-10的矩陣中。EB/+CSH復合物移植到6周齡小鼠的腎筋膜。

實例 3

　　體內小鼠胚胎干/間質細胞鑲嵌球移植KOU-CSH-10支架后新生毛發(fā)。
　　

　　方法：小鼠ES細胞和小鼠胚胎間充質細胞（MDU1）共培養(yǎng)以產生兩種細胞的鑲嵌球體。鑲嵌球體與KOU-CSH-10去端肽膠原蜂窩海綿混合，在6周齡小鼠的背部肌肉移植。

<參考文獻>
1. Suzuki T, et al. Growth inhibition and differentiation of cultured smooth muscle cells depend on cellular crossbridges across the tubular lumen of type I collagen matrix honeycombs. (2009) Microvasc Res. 77(2):143-149.